冰凍切片-20可以保存多久
博禾醫(yī)生
冰凍切片在-20℃條件下通常可保存1-3個(gè)月,實(shí)際保存時(shí)間受組織類型、預(yù)處理方式、冷凍保護(hù)劑使用、溫度穩(wěn)定性及密封條件等因素影響。
不同組織成分對(duì)冷凍保存的耐受性差異顯著。脂肪組織因脂質(zhì)易氧化,保存期一般不超過(guò)1個(gè)月;肌肉或肝臟等實(shí)質(zhì)性器官可維持2個(gè)月左右;腦組織等神經(jīng)組織因含水量高,需在2周內(nèi)使用以保持抗原性。
經(jīng)4%多聚甲醛固定的組織切片保存期可延長(zhǎng)至3個(gè)月,但可能影響后續(xù)免疫組化結(jié)果。新鮮速凍未經(jīng)固定的組織建議1個(gè)月內(nèi)使用,避免冰晶破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)。
添加30%蔗糖或OCT包埋劑的組織切片,能減少冰晶形成損傷,使保存期延長(zhǎng)至2-3個(gè)月。未添加保護(hù)劑的切片易出現(xiàn)冷凍偽影,建議1個(gè)月內(nèi)完成檢測(cè)。
20℃冰箱頻繁開(kāi)關(guān)會(huì)導(dǎo)致溫度波動(dòng)至-15℃以上,加速樣本降解。配備獨(dú)立冷凍艙或使用深冷保存盒的樣本,可比常規(guī)存放延長(zhǎng)1個(gè)月有效期。
真空密封的切片能避免凍干效應(yīng),維持3個(gè)月活性。普通密封袋保存時(shí)需配合干燥劑,防止水分升華導(dǎo)致切片龜裂,此類情況建議2個(gè)月內(nèi)使用完畢。
長(zhǎng)期保存建議采用-80℃超低溫環(huán)境,可維持樣本活性1年以上。日常使用前需平衡至-20℃避免反復(fù)凍融,取用后立即放回冷凍區(qū)。對(duì)于重要研究樣本,每份切片應(yīng)分裝存儲(chǔ)并標(biāo)注制備日期,定期檢查冰箱溫度記錄。短期保存時(shí)可配合防凍液浸泡的濾紙包裹切片,能有效防止冷凍過(guò)程中組織脫水。重要診斷樣本建議在1個(gè)月內(nèi)完成檢測(cè),科研用途樣本若需長(zhǎng)期保存,推薦采用液氮速凍后轉(zhuǎn)移至-80℃的方案。
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