瘧疾病原學(xué)診斷常用方法主要有外周血涂片鏡檢、快速診斷試驗(yàn)、聚合酶鏈反應(yīng)檢測、血清學(xué)抗體檢測、核酸雜交技術(shù)等。
外周血涂片鏡檢是瘧疾診斷的金標(biāo)準(zhǔn),通過吉姆薩染色后在顯微鏡下觀察紅細(xì)胞內(nèi)瘧原蟲形態(tài)。薄血膜可鑒別瘧原蟲種類,厚血膜能提高檢出率。該方法需要專業(yè)技術(shù)人員操作,檢出限為每微升血液50-100個(gè)原蟲。鏡檢可區(qū)分間日瘧、惡性瘧、三日瘧和卵形瘧原蟲,對臨床治療具有重要指導(dǎo)價(jià)值。
快速診斷試驗(yàn)主要檢測瘧原蟲特異性抗原,如惡性瘧原蟲富組氨酸蛋白-2和瘧原蟲乳酸脫氫酶。該方法操作簡便,15-20分鐘可獲結(jié)果,適合基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)使用。但無法區(qū)分瘧原蟲種類,且對低原蟲血癥敏感性較低。部分瘧疾流行區(qū)已出現(xiàn)HRP-2抗原缺失的惡性瘧原蟲,可能導(dǎo)致假陰性結(jié)果。
聚合酶鏈反應(yīng)檢測通過擴(kuò)增瘧原蟲特異性核酸序列實(shí)現(xiàn)診斷,靈敏度可達(dá)每微升血液1-5個(gè)原蟲。該方法可準(zhǔn)確鑒別瘧原蟲種類,檢測混合感染,適用于流行病學(xué)調(diào)查和低原蟲血癥病例。但需要專業(yè)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備和人員,檢測周期較長,成本較高,不適合現(xiàn)場快速診斷。
血清學(xué)抗體檢測通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等方法檢測患者血清中瘧原蟲特異性抗體,主要用于流行病學(xué)調(diào)查和輸血篩查。IgG抗體在感染后2周出現(xiàn)并持續(xù)較長時(shí)間,不能區(qū)分現(xiàn)癥感染和既往感染。IgM抗體提示近期感染,但存在交叉反應(yīng)可能。
核酸雜交技術(shù)利用標(biāo)記的核酸探針與瘧原蟲DNA或RNA特異性結(jié)合進(jìn)行檢測,具有較高敏感性和特異性。該方法可用于蟲種鑒定和耐藥基因檢測,但操作復(fù)雜且需要特殊儀器,臨床推廣應(yīng)用受限。近年來發(fā)展的環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)簡化了操作流程,更適合現(xiàn)場使用。
瘧疾確診需結(jié)合流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)和實(shí)驗(yàn)室檢查綜合判斷。急性期患者建議優(yōu)先采用外周血涂片鏡檢或快速診斷試驗(yàn),疑難病例可進(jìn)行分子生物學(xué)檢測。所有確診患者均需規(guī)范抗瘧治療,并做好防蚊隔離措施。疫區(qū)居民應(yīng)使用蚊帳、驅(qū)蚊劑等預(yù)防蚊蟲叮咬,出現(xiàn)周期性發(fā)熱癥狀應(yīng)及時(shí)就醫(yī)檢查。
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